灵芝在我国已有千年的药用历史，现代药理研究表明， 灵芝多糖具有调节物质代谢、降血糖、抗衰老、抗肿瘤、调节免疫等广泛的药理活性。有关多糖成分的提取，国内外主要采用热水浸提法或碱溶法。灵芝多糖存在于结构紧密的子实体细胞壁内，致使灵芝多糖的提取时间过长和提取不完全。
采用超微粉碎技术将灵芝子实体的细胞壁打破，并在国内、外率先采用微粉动态提取技术提取灵芝多糖，取得了较好的结果。同时利用扫描电镜对不同粒度的灵芝粉末进行了表征，初步揭示了灵芝微粉动态提取的基本原理。
1 仪器与材料
仪器：752pc紫外分光光度计；
BS一210S型电子天平；SZM系列超微粉碎机(泰安正信科技有限责任公司)；FZ一102微型植物试样粉碎机；微粉动态提取机
材料：葡萄糖(分析纯)，灵芝(购于泰山灵芝基地)。
2 实验方法与结果
2．1多糖提取方法
2．1．1常规提取：取灵芝粗粉(60目)，加水3次(9倍、6倍、6倍)撼，加热回流提取三次，每次1h，合并滤液，蒸干，备用。
2．1．2微粉动态提取：为考察不同提取温度对微粉动态提取效果的影响，采用25℃(常温)、6O℃ 、100℃ 三个条件进行动态提取。取灵芝微粉(300目)，加水量同常规提取，提取3次，每次lOmin。合并滤液，蒸干，制得不同温度提取物，备用。
2．2灵芝多糖含量测定
2．2．1检测方法：照《中国药典)2005年版一部灵芝项下多糖含量测定方法测定。多糖含量以无水葡萄糖表示。壹鱼垫至Q 堡! 堡 堕 AJJ~i 2005 Vo1．24，No．I2
2．2．2对照品溶液的制备：精密称取105"C干燥至恒重的葡萄糖对照品9．51mg，置lOOml容量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，即得(每lml中含无水葡萄糖0．0951mg)。
2．2．3标准曲线的制备：分别精密吸取对照品溶液0．2 ml、0．4 ml、0．6 ml、0．8 ml、1．Oml、1．2ml，置1Oral容量瓶中，加水至2．Oml，精密加入硫酸葸酮溶液(精密称取蒽酮0．1g，加80％的硫酸溶液lOOml使溶解，摇匀)6ml，摇匀，置水浴中加热15rain，取出，放入冰浴中冷却15rain，以相应的试剂为空白，照紫外一可见分光光度法(《中国药典)2005年版一部附录VA)，在625nm波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。得回归方程：A=94．2046C一0．00207，相关系数r=0．9996。表明葡萄糖在1．902～11．412~g‘ml-1范围内具有良好的线性关系。
2．2．4供试品溶液的制备：取不同提取方法制得的干燥物适盛，加水溶解，移至lOOml蜃瓶中，加水至刻度，摇匀，精密量取lOml，加入乙醇150ml，摇匀，4℃ 放置12h，取出，离心，倾去上清液，沉淀加水溶解并转移至50ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得。
2．2．5测定法：精密量取供试品溶液2ml，置lOml容量瓶中，
照标准曲线制备项下的方法，自“精密加入硫酸蒽酮溶液6ml”起，依法测定吸光度，从标准曲线读出供试品溶液中含葡萄糖的重 ，计算，即得。
3 结聚Ij讨论
对不同提取方法的干燥品测定灵芝多糖与浸膏的提取率。
试验结果显示，灵芝多糖的提取率，微粉动态提取比常规粗粉提取有很大的提高。
3．1从灵芝的显微结构看灵芝为真菌的干燥于实体，目前已知由骨架菌丝、缠绕菌丝等菌肉菌丝组成。菌丝的直径在1～4．5ttm 之间。从灵芝微粉与粗粉的电镜照片可以清晰看到，粗粉(除去结构过大无法拍照部分剩余的粉末)灵芝的部分菌丝体被打散，长度多为几百～ 几千／ana，很少被打断；另外还存在着未打散的菌肉、菌丝组织，结构尚未完全破坏。微粉灵芝的菌丝体绝大部分被打散成401~m 以下片段，并有大精被打损的菌倚细胞碎片。目前认为，灵芝中的主要有效成分大多存在于细胞内部。破壁细胞内部的有效成分很容易从破碎的细胞两端及菌竹破裂的细胞碎片转移到溶剂中。而灵芝粗粉的细胞内容物需要通过细胞壁的跨膜运动才能释放到溶剂中。多糖类物质多为分子齄在几万～几十万之间的大分子物质，仅靠单纯的扩散原理很难完全通过细胞壁。因此从显微结构上可以很好的解释微粉动态提取灵芝多糖明显高于常规提取的原因。
3．2从灵芝多糖的特性看 大多数多糖类在热水中的溶解性较好。从表中不同温度的微粉提取效率可以看出，多糖的微粉提取率随着温度的升高而提高。虽然在动态常温提取灵芝多糖的提取率高于传统方式，但从总体效果看，仍以加热提取为好。虽然微粉动态常温提取具有一定的优势，但也要针对不同物料的特性进行具体分析。对于无热敏性成分或者无具体要求的物料，可适当考虑改变提取方式。
3．3从浸膏提取率看 微粉动态提取的浸膏收率随温度的升高而有所增加，且同温状态下，微粉动态提取技术浸膏收率比常规提取方式高出22％ ，但浸膏收率的增加幅度小于多糖。从灵芝浸膏的组成分析，除含多糖之外，主要还由三萜类物质、核苷类、甾醇类及生物碱等小分子物质组成。由于此类物质的分子量较小，受细胞壁的阻碍影响亦小于大分子物质，因此浸膏收率的变化值较小。
3．4从灵芝提取物质量看灵芝提取物质量优劣，可以其中多糖的含量为指标。从这点考虑，采用微粉动态提取技术得到的灵芝浸膏质量明显好于传统方式提取的浸膏。如在等温条件下，微粉动态提取浸膏的多糖含鬣为22．63％ ，而传统方式下其浸膏多糖含量只有9．23％ ，微粉动态提取比传统方式高145％(表中无此数据)，即使是常温微粉动态提取的浸膏也比传统方式高10％左右。
3．5从总体结果看 采用微粉动态提取技术可以大幅度的提高灵芝多糖的提取率，缩短提取时间(提取时间缩短83％)，减少能源、资源的消耗，提高生产效率。药用真菌的多糖提取物一直是中药研究领域的热点之一
各类菌的组织结构与灵芝大同小异。因此。本研究为今后各类真菌的深度利用、开发提供J 一条新的思路。
